染色質(zhì)免疫共沉淀CHIP實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述：染色質(zhì)免疫共沉淀CHIP實(shí)驗(yàn)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA的片段，通過(guò)對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè)，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。

更新時(shí)間：2022-12-23
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實(shí)驗(yàn)

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詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)原理：
在保持組蛋白和DNA聯(lián)合的同時(shí)，染色質(zhì)被切成很小的片斷，通過(guò)運(yùn)用對(duì)應(yīng)于一個(gè)特定組蛋白標(biāo)記的生物抗體，將目標(biāo)片段（組蛋白發(fā)生特異標(biāo)記的片段）沉淀下來(lái)。ChIP是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合以及細(xì)菌蛋白質(zhì)的“protein A”特異性地結(jié)合到免疫球蛋白的Fc片段的現(xiàn)象合用開(kāi)發(fā)出來(lái)的方法（免疫磁珠結(jié)合proteinA，proteinA結(jié)合抗體Fc段，抗體結(jié)合抗原即發(fā)生特異標(biāo)記的組蛋白，這里要注意組蛋白是和DNA結(jié)合的，這樣就把目標(biāo)組蛋白和DNA的復(fù)合體沉淀下來(lái)了）。再將組蛋白與DNA分離，用獲得的DNA去做PCR分析和序列測(cè)定等檢測(cè)技術(shù)，從而進(jìn)一步檢測(cè)哪些基因的組蛋白發(fā)生了修飾。

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